一、细胞基本属性
细胞名称
人外周血间充质干细胞(Human Peripheral Blood Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称
PB - MSCs;外周血间充质干细胞;外周血MSC
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体经传染病及遗传病筛查)
组织来源
外周血单核细胞分离后贴壁筛选
生长特性
贴壁生长(依赖特定基质蛋白包被)
细胞形态
长梭形或成纤维样,单层贴壁后呈放射状排列
细胞代数
P3 - P10(确保多向分化潜能及基因组稳定性)
细胞规格
5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
专用MSC无血清培养基(含血小板裂解物及生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时(与供体年龄及培养密度相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱静置4小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即中和消化液
注意事项
• 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
• 首次传代后48小时内避免换液以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含5% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
• 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期存储
复苏验证
• 复苏后24小时活率检测≥90%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:三系分化潜能鉴定(成骨/成脂/成软骨诱导实验)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内检测出支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后活率低于85%(经我方实验室复检确认)
4. 细胞表面标志物(CD73/CD90/CD105阳性率<95%)
不予重发情形
1. 未按说明书要求进行预包被培养皿处理
2. 使用非指定培养基导致分化能力丧失
3. 解冻后未及时接种(超过2小时未处理)
4. 自行扩增后超过P10代数的功能异常投诉