人外周血间充质干细胞

人原代细胞

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XM-X20065×10^5人原代细胞7750


 一、细胞基本属性

细胞名称 

人外周血间充质干细胞(Human Peripheral Blood Mesenchymal Stem Cells) 

细胞别称 

PB - MSCs;外周血间充质干细胞;外周血MSC 

种属来源 

人(Homo sapiens) 

年龄性别 

健康成人(性别不限,供体经传染病及遗传病筛查) 

组织来源 

外周血单核细胞分离后贴壁筛选 

生长特性 

贴壁生长(依赖特定基质蛋白包被) 

细胞形态 

长梭形或成纤维样,单层贴壁后呈放射状排列 

细胞代数 

P3 - P10(确保多向分化潜能及基因组稳定性) 

细胞规格 

5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液) 

培养基 

专用MSC无血清培养基(含血小板裂解物及生长因子添加剂) 

培养条件 

气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95% 

冻存条件 

无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存 

倍增时间 

~72 - 96小时(与供体年龄及培养密度相关) 

供应限制 

仅限科研用途,不可用于临床治疗或商业用途


 二、细胞培养操作指南

收货处理 

• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀 

• 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱静置4小时 

传代标准 

细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次) 

传代比例 

1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²) 

消化方法 

• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂) 

• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即中和消化液 

注意事项 

• 避免机械刮取损伤细胞膜完整性 

• 首次传代后48小时内避免换液以维持细胞活性


 三、细胞冻存操作规范

冻存液配方 

无血清冻存液(含5% DMSO及海藻糖保护剂) 

细胞密度 

冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL 

冻存步骤 

• 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液 

• 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期存储 

复苏验证 

• 复苏后24小时活率检测≥90%(台盼蓝染色法) 

• 功能验证:三系分化潜能鉴定(成骨/成脂/成软骨诱导实验)


 四、售后服务承诺

重发标准 

1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录) 

2. 到货72小时内检测出支原体污染(需提供第三方检测报告) 

3. 复苏后活率低于85%(经我方实验室复检确认) 

4. 细胞表面标志物(CD73/CD90/CD105阳性率<95%) 

不予重发情形 

1. 未按说明书要求进行预包被培养皿处理 

2. 使用非指定培养基导致分化能力丧失 

3. 解冻后未及时接种(超过2小时未处理) 

4. 自行扩增后超过P10代数的功能异常投诉