一、细胞基本属性
细胞名称:人骨髓巨噬细胞(Human Bone Marrow Macrophages)
细胞别称:BMM;骨髓来源巨噬细胞;人源巨噬细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体无血液系统疾病史)
组织来源:骨髓单核细胞体外分化
生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞因子诱导)
细胞形态:活化前呈圆形,分化后伸展为梭形或多角形
细胞代数:P2 - P6(保持功能活性及吞噬特性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI 1640+10% FBS+20ng/mL M - CSF
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+细胞保护剂),液氮长期保存
增殖能力:原代细胞不增殖(终末分化细胞)
供应限制:仅用于基础科研,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
· 冻存管:37℃水浴轻柔解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基
· 培养瓶:酒精消毒表面,静置30分钟后换液培养
分化诱导:
· 采用M - CSF(20ng/mL)刺激单核细胞7天形成成熟巨噬细胞
换液频率:每48小时补充新鲜培养基(保留50%原培养液)
传代提示:终末分化细胞不建议传代(直接使用原代分化细胞)
功能检测:
· 吞噬实验:使用荧光标记微球评估吞噬活性
· 极化验证:通过LPS/IFN - γ或IL - 4/IL - 13诱导M1/M2表型
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+30% FBS)
冻存密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存程序:
· 4℃预冷10分钟
· 程序降温盒 - 80℃过夜
· 24小时内转移至液氮
复苏标准:
· 存活率≥85%(台盼蓝检测)
· CD14/CD68标志物表达率≥90%
· 脂多糖刺激后TNF - α分泌量≥500pg/mL
四、售后服务承诺
重发条件:
1. 到货干冰耗尽或温度记录异常(需提供物流凭证)
2. 72小时内检测出支原体污染(需第三方检测报告)
3. CD14阳性率低于85%(流式细胞术验证)
免责条款:
1. 细胞反复冻融(≥2次)导致功能丧失
2. 未使用配套细胞因子维持培养
3. 诱导分化后超过14天仍继续培养
4. 未按生物安全二级标准操作引发污染