一、细胞基本属性
细胞名称:人脾小梁平滑肌细胞(Human Splenic Trabecular Smooth Muscle Cells)
细胞别称:HSTSMC;脾小梁SMC;脾平滑肌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛查无脾脏疾病史)
组织来源:脾脏小梁结构
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质)
细胞形态:长梭形单层生长,融合后呈束状排列
细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 平滑肌特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~72 - 96小时(受细胞密度与基质类型影响)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
· 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时稳定
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每周传代1次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
· 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
· 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
· 避免剧烈吹打(防止肌丝结构损伤)
· 传代后48小时内避免频繁观察(减少机械应力干扰)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
· 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
· 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
· 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
· 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞阳性率>95%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度异常导致细胞失活(需提供运输温度记录)
2. 5日内确认微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(提供培养24小时显微照片)
4. 标志蛋白表达未达标准(需提供Western blot数据)
不予重发情形:
1. 收货后未按规范进行离心换液操作
2. 使用非配套培养基导致细胞去分化
3. 未定期进行肌源性标志物检测
4. 机械牵张实验未设置保护性基质层