一、细胞基本属性
细胞名称
人脾外周血单个核细胞(Human Peripheral Blood Mononuclear Cells from Spleen)
细胞别称
PBMC - SP;脾源性外周血单个核细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体经严格筛选无免疫系统疾病史)
组织来源
脾脏组织来源的外周血
生长特性
悬浮或半贴壁生长(需特定细胞因子支持)
细胞形态
圆形或类圆形单核细胞,偶见伪足延伸
细胞代数
原代细胞(P0,未经传代扩增)
细胞规格
1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
培养基
RPMI 1640基础培养基(含10% FBS + 1%双抗 + 2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
细胞活力
复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法验证)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或体外诊断
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 新鲜样本:4℃静置运输,立即进行密度梯度离心分离
传代标准
原代细胞不建议传代(需维持原代特性)
培养建议
- 接种密度:1×10^6 cells/mL(24孔板或T25培养瓶)
- 添加细胞因子:推荐使用IL - 2(50U/mL)维持活性
注意事项
- 避免频繁离心(防止机械损伤)
- 培养48小时后需更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO + 90% FBS)
细胞密度
冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 转入液氮长期保存
复苏验证
- 存活率检测:复苏后立即台盼蓝染色(≥90%为合格)
- 功能验证:经PHA刺激后CD3 + T细胞增殖能力检测
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控证明)
2. 收货后3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测报告)
3. 复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色图像)
4. 流式细胞术检测淋巴细胞亚群比例异常(与质控报告偏差>15%)
不予重发情形
1. 客户未按规范进行密度梯度离心导致细胞损失
2. 使用非推荐细胞因子或培养基导致功能异常
3. 样本反复冻融或超期保存(超过72小时未处理)
4. 未在生物安全柜内操作引发交叉污染
(注:本产品需配合伦理审查使用,禁止用于人体回输或基因编辑实验)