一、细胞基本属性
- 细胞名称：人外周血单个核细胞（Human Peripheral Blood Mononuclear Cells）
- 细胞别称：PBMC；外周血单个核细胞；外周血单核细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体经传染病及免疫疾病筛查）
- 组织来源：外周静脉血（密度梯度离心法分离）
- 生长特性：悬浮生长（短期培养需特定激活条件）
- 细胞形态：圆形单核细胞为主（含淋巴细胞、单核细胞等亚群）
- 细胞规格：5×10^6 cells/冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640基础培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及保护剂），-150℃以下长期保存
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 离心管：直接离心收集细胞，重悬于新鲜培养基。
- 短期培养建议：
- 激活条件：添加PHA或CD3/CD28抗体刺激（需根据实验目的优化）。
- 维持培养：每2 - 3天半量换液，避免细胞过度聚集。
- 注意事项：
- 避免长时间体外培养（建议72小时内完成实验）。
- 激活后细胞体积增大、形态不规则为正常现象。
- 分离后需尽快分装冻存，减少活性损失。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 冻存密度：1×10^7 cells/mL（推荐每管冻存1mL）
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 存活率检测：台盼蓝染色法（复苏后存活率≥90%）。
- 功能验证：流式细胞术检测CD3+/CD19+亚群比例（与供体信息一致）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度失控导致细胞失活（需提供温度记录证明）。
2. 3天内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测报告）。
3. 细胞存活率低于90%（台盼蓝染色法）。
4. 细胞亚群比例与标注差异＞10%（流式检测证明）。
- 不予重发情形：
1. 未按规范进行细胞复苏（如直接室温解冻）。
2. 分离后超过48小时未冻存导致细胞活性下降。
3. 未使用推荐激活剂导致实验功能异常。
4. 样本交叉污染或操作污染。
