一、细胞基本属性
- 细胞名称：人淋巴管内皮细胞（Human Lymphatic Endothelial Cells）
- 细胞别称：HLEC；淋巴管内皮细胞；LEC
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无淋巴系统疾病史）
- 组织来源：淋巴管组织（如皮肤或内脏淋巴管）
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈梭形或多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Growth Medium - 2（EGM - 2，含2% FBS及淋巴管内皮特异性添加因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（受细胞密度和生长因子浓度影响）
- 供应限制：仅限科研使用，不可用于临床治疗、诊断或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种至包被培养器皿
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置于培养箱2小时恢复微环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.02% EDTA或低浓度胰酶（如0.025% Trypsin - EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，终止后轻柔吹打避免机械损伤
- 注意事项
- 传代前需预包被培养皿（建议使用纤维连接蛋白或胶原）
- 更换培养基时保留部分原培养基以维持细胞旁分泌因子平衡
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化收集细胞后离心，重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：淋巴管标志物（如LYVE - 1、Prox1）免疫荧光染色确认
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. STR鉴定结果与备案数据不一致
4. 细胞复苏后存活率低于承诺值（经双方复测确认）
- 不予重发情形
1. 未按说明书预包被培养器皿导致贴壁失败
2. 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
3. 未执行无菌操作引发污染
4. 超低温保存设备故障导致的反复冻融
