一、细胞基本属性
细胞名称:人树突状细胞(Human Dendritic Cells)
细胞别称:DC细胞;抗原呈递细胞;免疫调节细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体经传染病筛查)
组织来源:外周血单核细胞体外诱导分化
生长特性:悬浮聚集体生长(依赖GM - CSF + IL - 4细胞因子)
细胞形态:不规则星状突起,表面富含微绒毛结构
细胞代数:原代培养不传代(建议直接使用诱导成熟体)
细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640 + 10% FBS + 100ng/mL GM - CSF + 50ng/mL IL - 4
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
成熟标志:CD83 + CD86 + HLADR +(流式检测纯度>85%)
供应限制:仅供免疫学研究,不可用于细胞治疗或异种移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,直接接种于预铺FN培养板
- 避免离心操作防止细胞聚集
激活方法:
- 使用LPS(100ng/mL)或CD40L(1μg/mL)刺激24小时
- 成熟后12小时内建议用于实验
注意事项:
- 严格无菌操作(原代细胞易污染)
- 培养期间每48小时半量换液补充细胞因子
三、细胞冻存操作规范
冻存时机:未成熟DC在诱导第5天冻存,成熟DC在激活后即刻冻存
冻存密度:1×10^7 cells/mL(高密度维持细胞相互作用)
冻存步骤:
- 温和离心去除细胞因子后重悬
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮贮存
功能验证:
- 复苏后吞噬功能检测(FITC - Dextran摄取实验)
- 混合淋巴细胞反应验证抗原呈递能力
四、售后服务承诺
质控标准:
1. 成熟标志物流式检测报告随货提供
2. 每批次提供TLR配体响应阳性对照数据
重发条款:
1. 细胞活率低于80%(PI染色法复检)
2. 内毒素检测>1EU/mL(LAL法验证)
免责声明:
1. 未按推荐进行TLR激活导致的实验失败
2. 超过72小时未使用成熟DC细胞
3. 自行添加非标细胞因子改变细胞表型
(注:以上内容基于常规DC细胞培养方案编写,具体参数请以实际产品说明书为准)