一、细胞基本属性
细胞名称:人初始T细胞(Human Naive T Cells)
细胞别称:CD4⁺CD45RA⁺T细胞;未活化T淋巴细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人外周血(性别不限,供体经传染病筛查)
组织来源:外周血单核细胞(PBMC)分选
生长特性:悬浮生长(依赖细胞因子激活)
细胞形态:圆形或类圆形,表面光滑,直径6 - 8μm
细胞纯度:流式检测CD3⁺CD4⁺CD45RA⁺≥95%
细胞规格:1×10⁶ cells/冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640+10% FBS+IL - 2(100 U/mL)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及保护剂), - 150℃以下长期保存
增殖特性:抗原呈递激活后进入增殖周期
供应限制:仅限基础研究,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基
• 激活建议:使用CD3/CD28抗体磁珠刺激,添加IL - 2(50 - 100 U/mL)
传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL或激活后增殖显著
传代方法:
• 轻柔离心收集细胞(200g×5min)
• 按1:2比例补加新鲜培养基及细胞因子
注意事项:
• 避免剧烈吹打(防止机械损伤)
• 激活后每48小时补充IL - 2
• 定期检测表面标志物(CD45RA/CD62L)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含7.5% DMSO及葡萄糖保护剂)
冻存密度:5×10⁶ cells/mL(推荐每管1mL)
冻存步骤:
• 离心去除培养液,缓慢滴加冻存液
• 程序降温:4℃平衡30min→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
• 存活率≥90%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:CFSE增殖检测(激活后72小时应进入分裂期)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常(需提供物流温度曲线)
2. 到货72小时内证实细菌/支原体污染(需提供检测报告)
3. 流式检测CD45RA阳性率<90%
4. 未激活状态下自发增殖率>5%
不予重发情形:
1. 未按规范添加细胞因子导致细胞凋亡
2. 使用非无菌操作引发污染
3. 磁珠分选后超过24小时未处理
4. 未定期检测细胞激活状态导致实验失败
(注:本产品需配合特异性抗原或激活试剂使用,培养过程中需定期监测细胞表型及功能状态)