一、细胞基本属性
- 细胞名称：人B淋巴细胞（Human B Lymphocytes）
- 细胞别称：B细胞；B淋巴母细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无免疫系统疾病史）
- 组织来源：外周血或骨髓来源的CD19+阳性分选细胞
- 生长特性：悬浮生长（部分亚群可短暂贴壁）
- 细胞形态：圆形或类圆形，直径10 - 15微米，胞质少且核质比高
- 细胞代数：原代细胞（建议实验使用P0 - P3代）
- 细胞规格：1×10^6 cells/冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS + 1%青霉素 - 链霉素+IL - 4/IL - 21细胞因子组合）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO + 细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 增殖特性：需抗原或CD40L刺激后活化扩增（静息状态维持期约5 - 7天）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体外诊断试剂开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预温培养基
- 悬浮培养瓶：直接置于CO₂培养箱静置4小时适应环境
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养基明显酸化（pH < 7.0）
- 传代比例：1:2至1:3（活化后细胞需根据增殖速度调整）
- 活化方法
- 使用CD40L + IL - 4联合刺激（浓度参照实验方案）
- 抗IgM抗体交联BCR通路诱导分化
- 注意事项
- 避免频繁离心（建议采用自然沉降法换液）
- 活化后需每日监测细胞团簇形成及凋亡情况
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 40% FBS基础保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心后缓慢滴加冻存液混匀，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CD19表面标志流式检测（阳性率≥95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
2. 到货72小时内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 流式检测CD19阳性率低于承诺值
4. 细胞活率未达合同约定标准（非操作原因）
- 不予重发情形
1. 未使用指定细胞因子组合导致活化失败
2. 实验过程中接触非无菌试剂引发污染
3. 未按规范进行细胞计数直接扩增培养
4. 液氮保存中断导致细胞复温损伤
