一、细胞基本属性
- 细胞名称:人踝/膝滑膜成纤维细胞(Human Ankle/Knee Synovial Fibroblasts)
- 细胞别称:HSF;关节滑膜细胞;滑膜间充质细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无关节疾病史)
- 组织来源:踝关节或膝关节滑膜组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤形,融合后呈平行排列
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用P5代以内以维持表型稳定)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与细胞活性和培养密度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于新鲜培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后立即转入培养箱平衡
- 传代标准:细胞融合度达90% - 95%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺),37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至完全分离
- 注意事项
- 传代后6小时更换培养基以去除死细胞
- 避免频繁换液(成纤维细胞分泌的基质蛋白对生长关键)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后与冻存液按比例混合,程序降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:胶原分泌量检测(P5代细胞应保持基质合成能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 到货干冰完全挥发导致细胞失活(需提供包装照片)
2. 5日内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
4. IL - 6分泌功能检测不达标
- 不予重发情形
1. 自行更改培养基配方导致细胞分化
2. 未使用胶原包被培养器皿影响细胞贴壁
3. 超代次使用(P8代以上)导致功能异常
4. 未按要求进行细胞特性验证直接用于实验