一、细胞基本属性
- 细胞名称：人椎间盘纤维环细胞
- 细胞别称：HDFC；纤维环细胞；椎间盘纤维软骨细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无脊柱退行性疾病史）
- 组织来源：椎间盘外层纤维环组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质支持）
- 细胞形态：长梭形或多角形，单层排列呈漩涡状
- 细胞代数：P3 - P8（确保表型稳定性与功能活性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：纤维软骨细胞专用培养基（含5% FBS + 转化生长因子β添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（依赖细胞密度与基质微环境）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含胶原酶辅助消化）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项：
- 避免机械刮取（保护细胞外基质合成能力）
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：Ⅱ型胶原免疫荧光染色（P5代细胞应维持基质分泌功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控报告）
2. 到货7天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞复苏存活率低于85%（经双方复核确认）
4. 细胞特异性标志物鉴定与描述不符
- 不予重发情形：
1. 客户未按操作指南进行复苏或传代
2. 使用非指定培养基导致细胞去分化
3. 实验操作污染导致交叉感染
4. 超过建议代数（P8）后出现的功能衰减
