一、细胞基本属性
- 细胞名称:人骨骼肌微血管内皮细胞(Human Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:HSkMEC;骨骼肌微血管内皮细胞;肌内皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肌肉或血管疾病史)
- 组织来源:骨骼肌组织微血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞外基质)
- 细胞形态:典型单层铺展,接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定及遗传一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:内皮细胞专用培养基(含2% FBS及内皮生长因子补充剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受细胞密度及基质影响)
- 供应限制:仅限科研使用,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入4mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达85% - 90%(推荐每3 - 4天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度5×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免消化过度(防止损伤细胞间连接)
- 传代后24小时更换培养基以清除残留酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
- 细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥95%)
- 功能验证:血管形成实验(P5代细胞需保持成管能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供干冰融化证据)
2. 3天内确认支原体/细菌污染(需提交检测报告)
3. 复苏后细胞活力低于90%(台盼蓝法验证)
4. STR分型与描述不符
- 不予重发情形
1. 客户未在72小时内复苏细胞
2. 使用非指定培养基导致功能异常
3. 反复冻融操作损伤细胞
4. 未按规范检测支原体直接实验
注:所有操作需符合生物安全规范,实验前请详阅说明书。