一、细胞基本属性
- 细胞名称：人骨微血管内皮细胞（Human Bone Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：HBMEC；骨微血管内皮细胞；骨内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无骨骼疾病史）
- 组织来源：骨组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相环境为5% CO₂与95%空气，恒温37℃，湿度维持在95%
- 冻存条件：采用无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），长期保存需置于 - 150℃以下超低温环境
- 倍增时间：约48 - 72小时（具体时长与培养密度及基质条件相关）
- 供应限制：本产品仅限于科研用途，禁止用于临床诊断治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管接收后需立即置于37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀；培养瓶外表面经75%酒精擦拭消毒后，静置于培养箱内平衡2小时。
- 传代标准：当细胞融合度达到85% - 90%时进行传代操作，常规培养周期为3 - 4天。
- 传代比例：建议按1:2至1:3比例分瓶，推荐初始接种密度为5×10³ cells/cm²。
- 消化方法：使用0.05% Trypsin - EDTA（不含Ca²⁺/Mg²⁺）进行消化；37℃孵育1 - 2分钟后显微镜下观察，待细胞收缩变圆即刻终止消化。
- 注意事项：严格控制消化时间以避免细胞间连接蛋白损伤；传代后需在24小时内更换新鲜培养基，确保彻底清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：专用无血清冻存液，含10% DMSO及细胞渗透保护成分。
- 细胞密度：冻存前调整细胞密度至1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后使用冻存液轻柔重悬；执行梯度降温程序：4℃平衡30分钟 → - 20℃预冻2小时 → - 80℃过夜冷冻 → 最终转移至液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏24小时内通过台盼蓝染色法检测细胞存活率，合格标准为≥95%；功能验证需完成Transwell通透性检测，要求P5代细胞仍保持基础屏障功能。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程中温度记录异常且提供干冰包装状态照片佐证；
2. 收货3日内提交有效的支原体/细菌污染PCR检测报告；
3. 台盼蓝染色法检测显示细胞复苏活力低于90%；
4. STR基因分型结果与产品描述不符。
- 不予重发情形：
1. 客户未在72小时内执行细胞复苏操作；
2. 擅自更换非指定培养基导致细胞功能异常；
3. 因不当操作造成的细胞反复冻融损伤；
4. 实验前未按标准流程进行支原体检测。
