一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肌源干细胞(Human Myogenic Stem Cells)
- 细胞别称:HMSC;骨骼肌干细胞;肌源性祖细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肌肉疾病史)
- 组织来源:骨骼肌组织(经酶消化法分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形或纺锤状,融合后呈定向排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保分化潜能及基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:肌源性干细胞专用培养基(含5% FBS + 成纤维生长因子 + 表皮生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖生长因子浓度及基质包被条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或异种移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱4小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达70% - 80%(避免过度融合导致自发分化)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 消化终止后需离心去除残留酶(防止细胞损伤)
- 传代后48小时内避免频繁观察(减少环境扰动)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 细胞悬液与冻存液按1:1比例混合
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 分化能力检测:成肌诱导7天后MyoD1表达阳性率≥90%
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 5日内确认支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色检测视频)
4. 细胞特异性标记物(如Pax7)检测未达标准
- 不予重发情形:
1. 未按指导使用非肌源性培养基导致分化异常
2. 冻存管解冻后未即时使用或二次冻存
3. 实验操作污染(如超净台未定期灭菌)
4. 未进行批次匹配检测直接开展跨代次实验
注:产品操作需严格遵守生物安全规范,所有数据基于标准实验条件,实际应用可能因个体差异需优化参数。