一、细胞基本属性
细胞名称
人肌腱细胞(Human Tendon Cells)
细胞别称
HTC;肌腱细胞;腱细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无肌腱损伤或疾病史)
组织来源
肌腱组织(取自手术废弃的肌腱样本)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
长梭形或纺锤形,成束状排列
细胞代数
P3 - P8(确保细胞功能稳定性与低传代衰老风险)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
成纤维细胞培养基(含10% FBS + 特定生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时(依赖培养密度与基质条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱平衡2小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.1%胶原酶辅助解离)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项
- 避免机械刮取损伤细胞(推荐酶消化法)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥85%)
- 功能验证:Ⅰ型胶原分泌检测(P5代细胞应维持胶原合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控报告)
2. 到货7天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于80%(按规范操作复测确认)
4. 细胞标志物检测结果与说明书不符
不予重发情形
1. 未按推荐条件进行原代细胞扩增
2. 使用机械法传代导致细胞成纤维化丢失
3. 未定期进行细胞形态学监控
4. 培养环境CO₂浓度长期偏离设定值