一、细胞基本属性
细胞名称
人肌腱干细胞(Human Tendon Stem Cells)
细胞别称
HTSCs;肌腱来源间充质干细胞;肌腱祖细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体无肌腱损伤或退行性疾病史)
组织来源
肌腱组织(取自手术切除的健康肌腱样本)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态
长梭形或纺锤形,贴壁后呈放射状排列
细胞代数
P3 - P8(维持干细胞特性及分化潜能)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
专用干细胞培养基(含10% FBS、bFGF、TGF - β及抗分化抑制剂)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间
约72 - 96小时(与细胞密度及生长因子浓度相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内植入
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基,接种至包被培养瓶;
培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置培养箱1小时后更换新鲜培养基。
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)。
传代比例
1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)。
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶);
37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落,立即加入含血清培养基终止。
注意事项
避免长时间消化(防止细胞表面标志物丢失);
传代后48小时内避免频繁观察,减少物理扰动。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)。
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管;
程序降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存。
复苏验证
复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%);
功能验证:成骨/软骨分化潜能检测(P4代细胞应维持多向分化能力)。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告);
3. 细胞存活率低于90%(经第三方检测确认);
4. 细胞表面标志物(CD73/CD90/CD105)表达不符。
不予重发情形
1. 未按规范进行胶原包被导致细胞贴壁失败;
2. 使用非推荐分化诱导剂导致细胞特性改变;
3. 冻存管开封后未一次用完,反复冻融;
4. 未定期检测支原体或交叉污染。
(注:以上内容基于科研级细胞产品通用规范编写,具体操作请参照随附说明书。)