一、细胞基本属性
细胞名称：人瘢痕疙瘩成纤维细胞（Human Keloid Fibroblasts）
细胞别称：HKF；瘢痕疙瘩成纤维细胞；皮肤纤维母细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：瘢痕疙瘩患者（性别不限，供体筛选无其他皮肤疾病史）
组织来源：瘢痕疙瘩组织（手术切除样本）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
细胞形态：长梭形或星形，贴壁伸展后呈不规则多角形
细胞代数：P3 - P8（维持胶原分泌功能及增殖活性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Fibroblast Growth Medium（含10% FBS + 成纤维细胞生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度及生长因子浓度）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项：
- 避免消化过度（损伤细胞外基质受体）
- 传代后48小时内避免频繁观察以降低机械刺激
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤：离心后重悬于预冷冻存液，分装至冻存管，梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞应保持Ⅰ/Ⅲ型胶原高表达）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程中温度记录异常（需提供物流温度曲线）
2. 收到后72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 复苏存活率低于85%（需提供染色结果及显微镜图像）
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形：
1. 未按推荐条件进行细胞复苏（如直接室温解冻）
2. 使用非指定培养基导致细胞功能异常
3. 实验操作不当导致细胞污染（如超净台未灭菌）
4. 未定期检测支原体而引发后续实验问题
