一、细胞基本属性
细胞名称：人成骨细胞（Human Osteoblasts）
细胞别称：HOB；成骨细胞；骨母细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无骨代谢疾病史）
组织来源：骨组织（髂骨或长骨骨小梁）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或明胶基质）
细胞形态：贴壁后呈多角形或纺锤形，成熟期可见钙结节沉积
细胞代数：P3 - P8（保持成骨分化潜能及矿化功能）
细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：成骨细胞专用培养基（含10% FBS+β - 甘油磷酸钠+抗坏血酸）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间：~72 - 96小时（与分化状态及诱导条件相关）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基离心重悬
培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱4小时平衡温湿度
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（需避免过度融合影响分化）
传代比例：1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.1%胶原酶）
37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞完全脱离
注意事项：
消化终止需立即加入含血清培养基
传代后48小时观察钙结节形成情况
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
细胞密度：1×10⁶ cells/mL（推荐分装1mL/冻存管）
冻存步骤：
离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
复苏后48小时检测碱性磷酸酶活性（ALP≥1.5 U/mg蛋白）
矿化功能验证：茜素红染色确认钙沉积能力（P5代应保持阳性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活
2. 7天内经PCR证实支原体污染
3. 细胞贴壁率低于80%（复苏后72小时评估）
4. 成骨特异性标记物（OCN、BSP）表达缺失
不予重发情形：
1. 未使用专用矿化诱导培养基导致功能异常
2. 长期传代超过P10导致分化能力丧失
3. 实验操作污染未执行标准灭菌流程
4. 未按要求进行周期性成骨功能验证
