一、细胞基本属性
细胞名称:人横纹肌细胞(Human Skeletal Muscle Cells)
细胞别称:HSkMC;骨骼肌细胞;横纹肌母细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体无肌肉系统疾病史)
组织来源:骨骼肌组织活检样本
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或多核管状结构,融合后呈现典型横纹特征
细胞代数:P2 - P6(确保肌源性分化潜能稳定)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:骨骼肌细胞专用培养基(含10% FBS + 成肌细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(与分化阶段相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外包装后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准:细胞融合度达70% - 80%(避免过度融合导致自发分化)
传代比例:1:2至1:3(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
注意事项:
- 消化后需立即加入含血清培养基终止反应
- 分化诱导阶段需更换低血清分化培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:肌管形成实验(P3代细胞应具备分化融合能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 7日内检测出支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞STR分型与备案信息不符
4. 复苏后肌源性标志物(如MyoD1、Myogenin)表达缺失
不予重发情形:
1. 未按规定进行胶原包被导致贴壁失败
2. 擅自使用非指定分化诱导方案影响细胞功能
3. 培养过程中污染未及时上报(超过72小时)
4. 液氮储存设备故障导致的细胞失活