一、细胞基本属性
- 细胞名称：人破骨细胞（Human Osteoclasts）
- 细胞别称：HOC；破骨前体细胞；骨吸收细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无骨代谢疾病史）
- 组织来源：外周血单核细胞或骨髓单核细胞（经诱导分化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖M - CSF与RANKL诱导分化）
- 细胞形态：多核巨细胞（直径50 - 100μm），边缘呈伪足状，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色阳性
- 细胞代数：P1 - P3（原代分化细胞，建议直接用于功能实验）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：α - MEM培养基（含10% FBS + 25ng/mL M - CSF + 50ng/mL RANKL）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 分化周期：7 - 14天（需定期补充诱导因子）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预混诱导因子的培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱平衡30分钟后更换新鲜诱导培养基
- 传代标准：单核前体细胞融合度达80%时启动分化（成熟多核细胞不建议传代）
- 诱导流程：单核细胞经M - CSF预培养3天，追加RANKL持续诱导4 - 10天
- 注意事项：严格无菌操作，分化期间每3天半量换液并补足诱导因子
- 功能验证：TRAP染色阳性率≥90%，骨磨片吸收实验确认骨降解活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 30% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 cells/mL（仅限单核前体细胞）
- 冻存步骤：收集未分化单核细胞，离心后重悬于冻存液，程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏要求：快速解冻后立即加入含M - CSF的培养基，48小时内启动分化程序
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 7天内证实支原体污染（需提供荧光PCR报告）
3. 单核细胞活力低于85%（台盼蓝染色法）
4. 分化能力未达标准（需提供TRAP染色及吸收实验数据）
- 不予重发情形
1. 未按规范进行诱导分化（如遗漏RANKL或M - CSF）
2. 冻存已分化的多核细胞导致功能丧失
3. 使用非配套培养基或血清批次
4. 超过推荐代数（P3）仍进行实验
