一、细胞基本属性
细胞名称
人黑色素瘤细胞(Human Melanoma Cells)
细胞别称
HMC;黑色素瘤细胞;皮肤恶性黑色素瘤细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
成年患者(原代细胞来源为临床确诊的黑色素瘤组织)
组织来源
皮肤黑色素瘤组织(原发或转移灶)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
不规则梭形或多角形,核质比高,部分呈簇状聚集
细胞代数
P3 - P10(经STR鉴定确保遗传背景稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基
RPMI - 1640(含10% FBS + 1%双抗 + 1%谷氨酰胺)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
胎牛血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~36 - 48小时(依赖肿瘤亚型与培养条件)
供应限制
仅限肿瘤机制研究,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于培养箱平衡4小时
传代标准
细胞融合度达70% - 80%(高密度易触发异常增殖)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
- 严格控制消化时间(肿瘤细胞连接松散易过度分离)
- 首次传代后需48小时适应期再更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
90% FBS + 10% DMSO(含抗氧化剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤
- 对数生长期细胞经离心后重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞活性(MTT法存活率≥85%)
- 功能验证:Transwell侵袭实验(P5代细胞应保持转移潜能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 干冰运输超温导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 5日内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. STR分型与说明书不符(需提供完整电泳图谱)
不予重发情形
1. 未使用指定包被基质导致贴壁失败
2. 擅自添加生长因子诱发细胞分化
3. 未定期传代导致细胞发生衰老
4. 实验操作污染未及时反馈