一、细胞基本属性
细胞名称：人髓核细胞（Human Nucleus Pulposus Cells）
细胞别称：HNP细胞；椎间盘髓核细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无脊柱退行性疾病史）
组织来源：椎间盘髓核组织
生长特性：贴壁生长（依赖特定细胞外基质支持）
细胞形态：原代培养早期呈梭形或多角形，传代后渐趋均一铺展
细胞代数：P3 - P8（确保细胞功能活性及表型稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：专用髓核细胞培养基（含5% FBS + 转化生长因子β1添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间：约72 - 96小时（受细胞密度及培养基活性成分影响）
供应限制：仅用于科学研究，不可应用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基轻柔混匀后离心去冻存液
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时恢复代谢
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（依据培养密度调整传代周期）
传代比例：1:2至1:3（建议初始接种密度为3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 采用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项：
- 严格控制消化时间以避免细胞外基质过度降解
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少培养环境波动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 消化收集细胞，离心后缓慢滴加冻存液重悬
- 程序降温：4℃平衡30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活性（台盼蓝染色存活率≥85%）
- 功能验证：糖胺聚糖分泌量检测（P4代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控证明）
2. 到货7日内确认支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏后细胞贴壁率低于70%（需提供明场显微图像）
4. 细胞特异性标记物（如CAⅫ）检测阴性
不予重发情形：
1. 未按说明书要求进行胶原酶辅助消化导致细胞损伤
2. 使用非配套培养基或擅自调整生长因子浓度
3. 细胞冻存后未及时转移至液氮导致结晶破坏
4. 实验操作污染导致细胞状态异常
注：本产品需配合专用细胞外基质包被培养器皿使用，详细操作指南见随货技术手册
