一、细胞基本属性
细胞名称
人脊柱炎髋关节滑纤维细胞(Human Ankylosing Spondylitis Hip Synovial Fibroblasts)
细胞别称
AS - HSF;滑膜成纤维细胞;髋关节滑膜细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
成年脊柱炎患者(确诊疾病,供体筛选符合研究伦理标准)
组织来源
髋关节滑膜组织(手术取材并经病理学确认)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或纺锤形,贴壁伸展后呈放射状排列
细胞代数
P3 - P8(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗 + 2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(依赖细胞活性与培养密度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时适应
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
- 避免消化过度(影响细胞外基质分泌功能)
- 首次传代后48小时内避免频繁观察扰动细胞
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮
复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(≥90%为合格)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持成纤维特性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 7天内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测结果)
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供显微镜观察图像)
4. STR谱系与数据库不匹配
不予重发情形
1. 未按说明书进行预包被处理导致细胞贴壁失败
2. 使用含高浓度抗生素的培养基抑制细胞生长
3. 自行修改冻存条件导致细胞损伤
4. 未定期进行支原体筛查引发交叉污染
(注:以上内容基于科研级细胞产品标准制定,具体操作需结合实验室条件优化。)