一、细胞基本属性
- 细胞名称:人骨骼肌细胞(Human Skeletal Muscle Cells)
- 细胞别称:骨骼肌成肌细胞;骨骼肌母细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肌肉疾病史)
- 组织来源:骨骼肌组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或层粘连蛋白包被基质)
- 细胞形态:长梭形或多核管状,分化后可见肌管形成
- 细胞代数:P3 - P8(确保肌源性分化潜能及功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:骨骼肌细胞专用培养基(含5% FBS + 成肌细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(与肌源性分化阶段相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(预温至37℃)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打(保护多核细胞结构完整性)
- 分化阶段需更换低血清诱导培养基(含2%马血清)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:肌管形成实验(P5代细胞应保持分化能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
2. 7日内证实支原体污染(需提供荧光PCR检测结果)
3. 细胞肌源性标志物(如MyoD)表达缺失
4. STR鉴定与备案信息不符
- 不予重发情形:
1. 解冻后超72小时未进行贴壁培养
2. 擅自使用非肌源性培养基导致分化异常
3. 未按规范进行胶原包被处理
4. 反复冻融导致细胞活性丧失
注:本产品需配合专用分化培养基完成肌管形成实验,建议培养过程中定期检测Desmin、Myogenin等肌源性标志物表达。