一、细胞基本属性
- 细胞名称：人毛囊角质细胞
- 细胞别称：毛囊上皮细胞、毛囊角质形成细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无皮肤病史）
- 组织来源：毛囊组织角质层
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：铺路石样单层排列，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P3 - P7（确保角蛋白表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
- 培养基：角质细胞专用培养基（含1.2mM钙离子 + 表皮生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含5% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃液氮长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（与钙离子浓度正相关）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加3mL预热培养基梯度稀释
- 培养瓶：酒精消毒外壁后静置培养箱4小时再换液
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲时终止
- 注意事项
- 钙离子浓度需严格控制在1.0 - 1.5mM范围
- 传代后12小时补充10ng/mL表皮生长因子
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含5% DMSO + 海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 4℃预冷细胞悬液10分钟
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 1小时 → - 80℃ 过夜 → 液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时角蛋白K14免疫荧光检测（阳性率需≥90%）
- 屏障功能验证：钙离子梯度诱导分化实验（P5代应形成紧密连接）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需第三方检测报告）
3. 细胞角蛋白表达阴性（提供免疫荧光图像）
4. 批次间STR分型不一致
- 不予重发情形
1. 使用非指定培养基导致分化异常
2. 未按规范进行胶原包被影响贴壁
3. 钙离子浓度超范围引发提前角化
4. 冻存管经历两次以上复温循环
