一、细胞基本属性
细胞名称:人脂肪微血管内皮细胞(Human Adipose Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称:HAMVEC;脂肪微血管内皮细胞;脂肪组织内皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
组织来源:脂肪组织微血管段
生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺展呈多边形,接触抑制后形成连续内皮屏障
细胞代数:P3 - P8(经端粒酶活性检测确认增殖潜能)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:EGM - 2 MV专用培养基(含5% FBS及血管生成因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
倍增时间:约60 - 72小时(基质涂层条件下)
供应限制:仅用于基础研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管复苏:37℃水浴轻摇解冻,加入5mL预温培养基离心洗涤
• 贴壁培养:胶原包被培养瓶静置培养4小时后再补足培养基
传代标准:融合度达90% - 95%(维持CD31阳性率>98%)
传代比例:1:2至1:3(建议使用0.1%明胶预包被培养皿)
消化方法:
• 采用0.25% Trypsin - EDTA(含1mM钙离子)
• 37℃消化3 - 5分钟,添加含血清培养基中和
注意事项:
• 维持培养基pH 7.2 - 7.4(频繁酸化提示代谢异常)
• 传代后需检测血管生成相关基因表达稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无动物源冻存液(含7.5% DMSO及羟乙基淀粉)
细胞密度:最佳冻存浓度1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
• 细胞悬液与冻存液等体积混合
• 分装至冻存管后立即置于程序降温仪(-1℃/min)
复苏验证:
• 复苏12小时后检测VE - cadherin膜定位完整性
• 功能性验证:乙酰化LDL摄取实验(P5代细胞应保持>85%摄取率)
四、售后服务承诺
重发标准:
• 物流温度记录仪显示> - 130℃持续超30分钟
• 收到后48小时内经流式检测CD34表达缺失
• 细胞贴壁率<70%(需提供相差显微镜图像)
• STR分型与数据库记录存在≥2个位点偏差
不承担责任情形:
• 未使用推荐浓度基质包被导致细胞脱落
• 擅自添加VEGF浓度>20ng/mL引发异常增殖
• 未执行内皮细胞专用传代程序造成分化
• 超过建议代数(P8)后出现的功能衰退
(注:本产品符合国际细胞库认证标准,每批次提供细胞STR图谱、支原体检测报告及三代增殖能力验证数据)