一、细胞基本属性
- 细胞名称:人前脂肪细胞(Human Preadipocytes)
- 细胞别称:脂肪前体细胞;脂肪基质细胞;脂肪祖细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
- 组织来源:皮下或内脏脂肪组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形成纤维样,增殖期呈单层平行排列
- 细胞代数:P3 - P6(确保分化潜能与遗传稳定性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Preadipocyte Growth Medium(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 分化能力:可诱导分化为成熟脂肪细胞(油红O染色验证脂滴积累)
- 供应限制:仅供体外研究使用,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免频繁传代(可能导致分化能力下降)
- 分化诱导需更换含胰岛素/地塞米松的专用培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
- 冻存密度:1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 细胞悬液与冻存液按1:1混合
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 分化验证:诱导14天后脂滴形成率≥70%
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 未分化细胞占比低于90%(流式检测CD34 + 比例)
4. 细胞分化功能不达标(油红O染色阴性)
- 不予重发情形:
1. 未使用推荐诱导分化方案
2. 细胞培养超过建议代数(P6以上)
3. 自行修改冻存液配方导致细胞损伤
4. 未按要求进行收货后即时处理