一、细胞基本属性
- 细胞名称：人真皮成纤维细胞（Human Dermal Fibroblasts）
- 细胞别称：HDF；真皮成纤维细胞；皮肤成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无皮肤疾病史）
- 组织来源：真皮层组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或星形，贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保证增殖活性与分泌功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖细胞密度与培养基活性）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间隙增大后立即终止。
- 注意事项：
- 避免消化过度（损伤细胞膜表面受体）。
- 首次换液需在传代后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后弃上清，轻柔重悬细胞于冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色法≥90%）。
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持ECM合成功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）。
2. 72小时内证实微生物污染（需提供污染检测图像）。
3. 复苏存活率低于承诺标准（以第三方检测报告为准）。
4. 细胞STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形：
1. 客户未按规范进行细胞复苏或传代操作。
2. 使用非配套培养基导致功能异常。
3. 细胞冻存管反复冻融超过2次。
4. 实验过程中未执行标准无菌操作流程。
