一、细胞基本属性
- 细胞名称:人子宫内膜异位症间质细胞(Human Endometriosis Stromal Cells)
- 细胞别称:EMSIS细胞;子宫内膜异位症基质细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:确诊子宫内膜异位症的女性患者(供体筛选符合临床诊断标准)
- 组织来源:子宫内膜异位症病灶组织(卵巢或盆腔异位内膜)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,成束状排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保表型稳定性及功能特性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Stromal Cell Medium(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子 + 雌激素类似物)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖激素浓度及基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺),37℃消化3 - 5分钟,终止液需含10% FBS
- 注意事项:
- 避免机械吹打过度导致细胞碎片增多
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时进行活性检测(台盼蓝染色存活率≥85%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞分化潜能
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控截图)
2. 到货72小时内PCR检测证实微生物污染
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
4. 复苏后活性低于承诺标准(附检测视频)
- 不予重发情形:
1. 使用非配套培养基或自行修改培养条件
2. 未按规范进行胶原包被导致贴壁失败
3. 超过推荐代数(P8)仍继续传代
4. 未提供完整的污染检测原始数据