一、细胞基本属性
- 细胞名称:人卵巢成纤维细胞(Human Ovarian Fibroblasts)
- 细胞别称:HOF;卵巢基质细胞;卵巢间质成纤维细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成年女性(供体筛选无生殖系统疾病史)
- 组织来源:卵巢间质组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,呈平行束状排列
- 细胞代数:P3 - P8(经功能验证确保活性与分泌特性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子补充剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 60小时(受血清浓度及细胞密度影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后立即移入培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达90% - 95%(建议每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项
- 终止消化时需添加含血清培养基中和酶活性
- 传代后48小时内避免频繁观察以防扰动贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 细胞悬液与冻存液按比例混合后分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应维持ECM合成能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控证明)
2. 到货7日内经PCR证实支原体污染
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供显微影像记录)
4. 细胞特异性标记物检测不达标
- 不予重发情形
1. 未按说明书要求进行胶原包被导致贴壁失败
2. 自行更改培养基配方引发细胞特性改变
3. 使用非配套生长因子添加剂
4. 未定期进行传代导致细胞过度老化