一、细胞基本属性
- 细胞名称：人睾丸血管内皮细胞（Human Testicular Vascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：HTVEC；睾丸微血管内皮细胞；睾丸内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：睾丸组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型单层铺路石样，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS + 内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置于培养箱内2小时，待温度平衡后换液。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度5×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞边缘收缩后立即终止。
- 注意事项：
- 避免消化过度（防止细胞间连接蛋白损伤）。
- 传代后24小时内更换培养基以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转入液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率（需≥95%）。
- 功能验证：CD31免疫荧光染色确认内皮标志物表达（P5代细胞应维持特征蛋白表达）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰包装状态证明）。
2. 3日内证实微生物污染（需提供PCR检测报告）。
3. 细胞复苏后活力低于90%（台盼蓝染色法复检）。
4. STR鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
1. 客户延迟复苏超过72小时。
2. 使用非推荐培养基导致细胞状态异常。
3. 反复冻融或操作不当引起的细胞损伤。
4. 未按规范进行污染检测直接开展实验。
