一、细胞基本属性
细胞名称:人附睾管上皮细胞(Human Epididymal Epithelial Cells)
细胞别称:HEEC;附睾上皮细胞;附睾管细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无生殖系统疾病史)
组织来源:附睾组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支持)
细胞形态:单层铺展,融合后呈立方形或柱状排列
细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和遗传一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:上皮细胞专用培养基(含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约60 - 72小时(受培养密度和生长因子影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀后离心重悬
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱内平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含低浓度Ca²⁺),37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:避免过度消化损伤细胞极性结构,传代后需稳定6小时再更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
细胞密度:推荐冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后24小时进行活率检测(台盼蓝染色活率≥90%),功能验证:跨膜电阻检测(P5代细胞应保持正常屏障特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏活率低于85%(经台盼蓝染色复测确认)
4. 细胞标志物鉴定与描述不符
不予重发情形:
1. 解冻后未及时接种(超过6小时未处理)
2. 使用非指定培养基导致细胞分化异常
3. 不当冻融循环操作造成损伤
4. 未按要求进行定期支原体检测
注:以上内容基于常规实验数据编写,具体操作请结合文献与细胞状态调整。