一、细胞基本属性
细胞名称:人输精管平滑肌细胞(Human Vas Deferens Smooth Muscle Cells)
细胞别称:HVDSMC;输精管平滑肌细胞;生殖道平滑肌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无生殖系统疾病史)
组织来源:输精管中膜层平滑肌组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质包被)
细胞形态:典型长梭形或纺锤状,成束定向排列
细胞代数:P3 - P8(保证收缩功能与表型稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 平滑肌特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度及生长因子浓度)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后离心去冻存液,重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞骨架结构
- 传代后48小时内监测α - SMA免疫荧光标记以确认表型
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:钙离子刺激收缩实验(P5代细胞应保持收缩响应性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)
2. 7日内经PCR证实支原体污染
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
4. 复苏存活率低于85%(需提供染色检测视频)
不予重发情形:
1. 解冻后超48小时未进行贴壁操作
2. 使用非平滑肌专用培养基导致表型丢失
3. 未按规范进行胶原酶辅助消化引发细胞碎裂
4. 私自进行基因编辑导致功能异常
(注:本产品需严格遵守生物安全规范,禁止跨物种共培养实验)