一、细胞基本属性
细胞名称
人睾丸白膜成纤维细胞(Human Tunica Albuginea Fibroblasts)
细胞别称
HTAF;睾丸被膜成纤维细胞;睾丸间质成纤维细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成年男性(供体筛选无生殖系统疾病史)
组织来源
睾丸白膜组织(经显微分离纯化)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白基质)
细胞形态
典型长梭形或纺锤形,胞质伸展明显
细胞代数
P3 - P8(确保功能活性及遗传稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Fibroblast Medium(含5% FBS + 成纤维细胞生长添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(受细胞密度及传代条件影响)
供应限制
仅限科学研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达90% - 95%(常规培养每4 - 5天传代)
传代比例
1:2至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶辅助消化)
• 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
• 严格控制消化时间(避免细胞外基质过度降解)
• 首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心后轻柔重悬细胞于预冷冻存液
• 程序降温:4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
• 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞维持收缩表型)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 5天内确认支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4. 细胞STR谱系鉴定不匹配
不予重发情形
1. 客户未按规范进行预培养直接冻存
2. 使用非指定培养基导致细胞分化异常
3. 未执行梯度降温的自主冻存操作
4. 超过72小时未进行污染检测即开展共培养实验