一、细胞基本属性
细胞名称:人宫颈上皮细胞(Human Cervical Epithelial Cells)
细胞别称:HCEpiC;宫颈上皮细胞;宫颈鳞状上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无宫颈疾病史)
组织来源:宫颈上皮组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型铺路石样单层,融合后呈多角形紧密排列
细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含1% FBS + 上皮细胞特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(受培养密度及传代处理影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
• 37℃消化2 - 3分钟,细胞边缘卷曲时立即终止反应
注意事项:
• 严格控制消化时间(避免细胞间连接蛋白降解)
• 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
• 离心后弃上清,轻柔重悬于预冷冻存液
• 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
• 复苏后48小时内进行活率检测(台盼蓝染色存活率≥90%)
• 功能验证:角蛋白19免疫荧光染色(P5代细胞应保持上皮标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提交开箱温度监测数据)
2. 7日内经PCR证实支原体污染(需提供完整实验流程记录)
3. 复苏存活率低于85%(按标准台盼蓝染色流程操作)
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未在48小时内完成复苏操作
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 多次冻融导致胞内冰晶损伤
4. 未执行推荐的胶原包被步骤而影响贴壁效率
(注:所有操作需遵守生物安全规范,细胞不可用于人体植入或商业转售)