一、细胞基本属性
- 细胞名称：人宫颈成纤维细胞（Human Cervical Fibroblasts）
- 细胞别称：HCF；宫颈基质细胞；宫颈成纤维样细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人女性（供体筛选无宫颈病变史）
- 组织来源：宫颈组织基质层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或星形，呈放射状或漩涡状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保持细胞增殖活性与分泌功能）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 双抗 + 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖血清浓度与接种密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免过度传代导致细胞衰老（建议使用P8代以内细胞）
- 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P5代细胞应保持分泌活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
2. 7日内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏后贴壁率低于80%（需提供明场显微照片）
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
1. 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引发细胞异常分化
3. 未按规范进行传代造成细胞老化
4. 液氮储存设备故障导致的细胞失活
注：所有操作需遵守生物安全二级实验室规范，细胞特性可能因个体差异存在轻微波动。
