一、细胞基本属性
细胞名称:人子宫瘤细胞(Human Uterine Tumor Cells)
细胞别称:子宫肿瘤细胞;子宫癌细胞;HUTC
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年女性(供体经病理确诊为子宫瘤患者)
组织来源:子宫瘤组织手术样本(经无菌处理及病理分型验证)
生长特性:贴壁生长(基质依赖性,可形成致密单层)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,部分呈现侵袭性伪足
细胞代数:P3 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含血清替代型冻存液)
培养基:RPMI 1640 + 10% FBS + 1%双抗 + 表皮生长因子(10ng/mL)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及血清替代物),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养基更新频率相关)
供应限制:仅供肿瘤机制研究,不可用于药物筛选或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴解冻后,离心去除冻存液,用预热培养基重悬
• 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时待细胞贴壁后更换新鲜培养基
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
• 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
• 消化终止需立即加入2倍体积含血清培养基
• 传代后12小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO + 20% FBS)
细胞密度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL(高密度确保复苏效率)
冻存步骤:
• 消化后离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀
• 梯度降温:4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
• 复苏后48小时内完成活力检测(台盼蓝拒染率≥85%)
• 功能验证:划痕实验检测迁移能力(P5代细胞应保持典型侵袭特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输箱温度记录> - 130℃导致细胞失活(需提供温度记录仪数据)
2. 48小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
3. STR分型与数据库不符(需提供第三方检测报告)
4. 复苏后贴壁率低于60%(需提交24小时显微照片)
不予重发情形:
1. 使用非标准培养基导致细胞分化异常
2. 未按时传代引发细胞老化(传代间隔>5天)
3. 实验污染未及时处理导致交叉污染
4. 未按规范进行CO₂浓度校准影响增殖速率