一、细胞基本属性
- 细胞名称:人乳腺导管上皮细胞(Human Mammary Ductal Epithelial Cells)
- 细胞别称:HMEC;乳腺上皮细胞;乳腺导管细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无乳腺疾病史)
- 组织来源:乳腺导管组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或基底膜基质)
- 细胞形态:单层铺路石状排列,接触抑制后呈多边形或鹅卵石样
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Mammary Epithelial Cell Growth Medium(含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度及基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀离心后接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每3 - 4天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.05% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免过度消化(影响细胞间紧密连接完整性)
- 传代后24小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法,存活率≥90%)
- 功能验证:CK18免疫荧光鉴定(P5代细胞应维持上皮特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货3天内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 复苏后存活率低于承诺值(需提供台盼蓝染色图)
4. 细胞STR鉴定与备案信息不符
- 不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时
2. 使用非指定培养基导致细胞形态异常
3. 未按规范进行梯度降温导致冻存失败
4. 未定期检测支原体引发交叉污染
注:所有操作需遵守生物安全规范,细胞特性可能因实验条件存在个体差异