一、细胞基本属性
细胞名称：人乳腺成纤维细胞（Human Mammary Fibroblasts）
细胞别称：HMF；乳腺基质细胞；乳腺成纤维样细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无乳腺疾病史）
组织来源：乳腺组织基质层
生长特性：贴壁生长（依赖贴壁表面与血清成分）
细胞形态：长梭形或星形，单层生长时呈放射状排列
细胞代数：P3 - P8（维持功能活性与遗传稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~36 - 48小时（依赖血清浓度与细胞密度）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：
· 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
· 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时平衡
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
· 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
· 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞变圆后立即终止
注意事项：
· 避免过度传代（P8后可能出现衰老表型）
· 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以防脱壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
· 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
· 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
· 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
· 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应保持基质细胞特性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
3. 细胞存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
4. STR分型与存档数据不符
不予重发情形：
1. 客户未按规范进行细胞复苏或贴壁前换液
2. 自行更改培养基配方导致细胞形态异常
3. 未定期传代导致细胞过度融合老化
4. 未使用原代冻存液进行二次冻存造成损伤
（注：所有操作需符合生物安全二级实验室规范，细胞特性可能因供体差异存在批次间波动）
