一、细胞基本属性
- 细胞名称:人乳腺上皮细胞(Human Mammary Epithelial Cells)
- 细胞别称:HMEC;乳腺上皮细胞;乳腺导管上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成年女性(供体筛选无乳腺疾病史)
- 组织来源:正常乳腺导管或腺泡组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或特定基质包被)
- 细胞形态:单层铺展呈“铺路石样”或多边形,接触抑制后排列紧密
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与表型一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:乳腺上皮细胞专用培养基(含5% FBS + 表皮生长因子 + 氢化可的松)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(依赖培养基成分及传代密度)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基,接种于胶原包被的培养皿。培养瓶:75%酒精擦拭外表面,静置培养箱1小时平衡温度与pH。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项:避免消化时间过长导致细胞膜损伤;传代后12小时更换培养基以去除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 90%培养基)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻悬于冻存液,分装至冻存管,按梯度降温程序:4℃ 30分钟→ -80℃ 24小时→液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后48小时内检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%);功能验证包括角蛋白18免疫荧光染色确认上皮特性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);
2. 收到细胞3天内经检测证实支原体污染(需提供第三方检测报告);
3. 复苏后细胞活性低于85%(需提供台盼蓝染色结果);
4. STR分型与产品描述不符。
- 不予重发情形:
1. 客户未在72小时内复苏细胞;
2. 使用非推荐培养基或基质导致细胞异常;
3. 擅自修改培养条件或反复冻融;
4. 未按规范进行污染检测直接用于实验。