一、细胞基本属性
细胞名称
人子宫内膜平滑肌细胞(Human Endometrial Smooth Muscle Cells)
细胞别称
HUtSMC;子宫内膜肌层细胞;子宫平滑肌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别:女性,供体筛选无子宫内膜病变史)
组织来源
子宫内膜肌层组织
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或纺锤形,平行排列成束状结构
细胞代数
P3 - P8(确保收缩功能及表型稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基
平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS + 生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约72 - 96小时(受培养基成分及细胞密度影响)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,转移至含5mL培养基的离心管轻缓混匀
• 培养瓶:表面消毒后静置培养箱2小时再观察贴壁情况
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻柔拍打促进细胞脱落
注意事项
• 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
• 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO + 胎牛血清替代物)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 消化离心后重悬于预冷冻存液
• 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后48小时进行活率检测(台盼蓝染色≥90%)
• 功能验证:钙离子荧光标记法检测收缩功能(P5代细胞应保持生理响应性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 收货7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
4. α - SMA免疫荧光鉴定阴性
不予重发情形
1. 未按推荐方法进行胶原包被预处理
2. 使用高浓度胰酶(>0.25%)导致细胞损伤
3. 培养环境CO₂浓度异常影响细胞状态
4. 未进行定期形态学记录影响问题追溯