一、细胞基本属性
- 细胞名称:人子宫内膜上皮细胞(Human Endometrial Epithelial Cells)
- 细胞别称:HEEC;子宫内膜上皮细胞;宫腔上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成年女性(供体筛选无子宫内膜病变及内分泌疾病史)
- 组织来源:子宫内膜功能层(经宫腔镜或手术获取)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或基质胶包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺展呈多边形,细胞核清晰,胞质透亮
- 细胞代数:P3 - P6(维持激素受体表达及上皮屏障特性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用上皮细胞培养基(含1% FBS + 上皮生长因子 + 雌孕激素添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~60 - 72小时(受激素水平及培养密度影响)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床治疗或生殖相关实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙镁平衡液)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取(保护细胞间紧密连接结构)
- 传代后48小时内避免换液以维持激素微环境
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO + 葡萄糖平衡液)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:免疫荧光检测E - cadherin表达(P4代细胞应保持上皮特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 物流温控失效导致细胞失活(需提供运输温度记录)
2. 7日内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 复苏后活率低于85%(需提供染色视频记录)
4. 免疫标志物鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
1. 超时复苏(收货后未在48小时内处理)
2. 自行添加激素或生长因子导致功能异常
3. 未使用专用基质胶影响细胞贴壁
4. 未进行定期支原体检测引发交叉污染