一、细胞基本属性
细胞名称:人卵巢间质细胞(Human Ovarian Stromal Cells)
细胞别称:HOSC;卵巢基质细胞;卵巢间质成纤维细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无生殖系统疾病史)
组织来源:卵巢皮质间质组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:成纤维细胞样梭形,单层培养时呈放射状排列
细胞代数:P3 - P8(维持内分泌功能与细胞增殖活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Stromal Cell Medium(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~72 - 96小时(受激素环境影响显著)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 避免频繁换液(间质细胞分泌功能依赖自分泌因子)
- 传代后48小时内避免激素干预实验
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活力(台盼蓝染色存活率≥85%)
- 功能验证:孕酮基础分泌量检测(P5代细胞应维持激素合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 7天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(按规范操作前提下)
4. 细胞特异性标志物鉴定不符(如Vimentin阳性率<90%)
不予重发情形:
1. 解冻后未在48小时内贴壁即判定异常
2. 使用含雌激素的未经验证培养基
3. 未按推荐密度接种导致细胞老化
4. 未执行标准传代流程引发基因型漂变
(注:以上内容基于科研级细胞通用规范编写,具体实验需结合文献优化条件)