一、细胞基本属性
细胞名称:人甲状旁腺细胞(Human Parathyroid Cells)
细胞别称:甲状旁腺主细胞;HPTC
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无内分泌疾病史)
组织来源:甲状旁腺组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
细胞形态:多边形或类圆形,聚集生长时呈腺泡样结构
细胞代数:P2 - P6(维持激素分泌功能稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:甲状旁腺细胞专用培养基(含1% ITS + 补充剂+10% FBS)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物),液氮长期保存
倍增时间:~72 - 96小时(受钙离子浓度调控)
供应限制:仅供基础研究,禁止用于药物开发或移植治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入预热的培养基低速离心后重悬
- 培养瓶:酒精消毒外表面,静置于培养箱平衡4小时再换液
传代标准:细胞汇合度达80% - 85%(钙离子浓度需维持1.2mmol/L)
传代比例:1:1至1:2(建议胶原酶消化后机械吹打分散)
消化方法:
- 采用0.1%胶原酶IV型溶液(含0.01% EDTA)
- 37℃消化8 - 10分钟,终止后离心保留细胞团块完整性
注意事项:
- 培养基需每周检测钙离子浓度(推荐范围1.0 - 1.5mmol/L)
- 避免频繁换液导致PTH分泌功能衰减
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+1% HEPES缓冲液)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后立即开启程序降温
- 梯度降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(需≥70%)
- 功能验证:甲状旁腺激素(PTH)ELISA检测(P3代细胞分泌量应>50pg/10⁴ cells/24h)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录仪显示低于 - 150℃超时(需提供温度曲线)
2. 到货7日内经qPCR确认支原体污染
3. 复苏后细胞存活率<80%(台盼蓝与Calcein - AM双标法)
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未使用指定胶原包被培养皿导致细胞脱落
2. 自行调整培养基钙离子浓度引发功能异常
3. 消化时间超过15分钟导致细胞膜损伤
4. 未定期检测培养基渗透压(要求280 - 320mOsm/kg)