一、细胞基本属性
细胞名称：人胰腺癌相关成纤维细胞（Human Pancreatic Cancer - Associated Fibroblasts）
细胞别称：CAFs；胰腺癌基质成纤维细胞；胰腺肿瘤成纤维细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：胰腺癌患者（性别不限，经病理确诊且无其他系统性疾病）
组织来源：胰腺癌组织间质（经病理分选及胶原酶消化法分离）
生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被的培养基底）
细胞形态：长梭形或星状，胞质延展性强，细胞核卵圆形
细胞代数：P3 - P6（维持肿瘤微环境相关表型稳定性）
细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 碱性成纤维生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间：约72 - 96小时（与肿瘤微环境模拟条件相关）
供应限制：仅限肿瘤微环境研究，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱4小时适应环境
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代一次）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项：
- 避免机械刮取（保护细胞伪足完整性）
- 首次传代后48小时内避免频繁观察
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后梯度降温：4℃ 1h → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（标准≥85%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P4代细胞应保持活化状态）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常（需提供物流温度追踪报告）
2. 收到后72小时内证实支原体污染（需提供荧光定量PCR结果）
3. 细胞活性低于80%（经台盼蓝与Calcein - AM双标检测）
4. 特异性标志物（FAP/α - SMA）表达缺失
不予重发情形：
1. 未使用原代分离配套培养基进行培养
2. 擅自进行基因编辑操作导致表型改变
3. 培养环境中缺乏基质胶三维支持
4. 超过建议代数（P6）仍要求功能质控达标
注：所有操作需符合生物安全二级实验室规范，建议定期进行STR分型检测以确保细胞特异性。
