一、细胞基本属性
细胞名称
人胰腺癌细胞(Human Pancreatic Carcinoma Cells)
细胞别称
胰腺导管腺癌细胞;胰腺腺泡细胞癌;HPAC
种属来源
人(Homo sapiens)
疾病背景
源自胰腺癌组织,经病理分型确认为恶性肿瘤细胞
组织来源
胰腺导管或腺泡组织(具体亚型根据STR数据注明)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
不规则多边形或梭形,核质比高,成簇生长倾向
细胞代数
P4 - P10(经端粒酶活性检测确认增殖稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含胎牛血清替代型冻存液)
培养基
RPMI - 1640(含10% FBS + 1%丙酮酸钠 + 5 ng/mL表皮生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无动物成分冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
倍增时间
约36 - 60小时(受培养密度及微环境影响显著)
供应限制
仅限于肿瘤机制研究,禁止用于体内移植或药物开发外的商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管需37℃水浴解冻后离心去冻存液,使用预温培养基重悬接种
培养瓶收货后静置4小时再换液,避免机械应力损伤
传代标准
融合度达70% - 80%即需传代(高密度易引发自发分化)
传代比例
1:3至1:6(根据实验需求调整,维持对数生长期)
消化方法
0.25%胰酶 - EDTA消化2 - 3分钟,加入含血清培养基终止
注意事项
传代后需48小时稳定期,期间避免换液操作
建议定期进行KRAS基因突变验证(保障模型稳定性)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
血清替代型冻存液(含10% DMSO + 90%条件培养基)
细胞密度
冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
消化后细胞经梯度离心去除碎片,冻存管标记突变位点信息
程序降温仪控制速率(-1℃/min至 - 80℃后转入液氮)
复苏验证
存活率≥85%(台盼蓝法),贴壁率≥70%(24小时评估)
功能验证包括CCK - 8增殖曲线与划痕实验(P5代内数据偏差≤15%)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 到货干冰完全升华且细胞活率低于80%
2. 72小时内STR分型显示交叉污染(提供双向检测报告)
3. 原代鉴定的特征性基因突变丢失(如TP53、SMAD4)
免责条款
1. 客户自行采用3D培养导致基因表达谱改变
2. 未使用配套基质胶引发上皮 - 间质转化
3. 超过推荐代数(P10)后出现的增殖衰减