一、细胞基本属性
细胞名称
人扁桃体成纤维细胞（Human Tonsil Fibroblasts）
细胞别称
HTF；扁桃体成纤维细胞；扁桃体基质细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康儿童或成人（性别不限，供体筛选无扁桃体感染史）
组织来源
扁桃体组织基质层
生长特性
贴壁生长（依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿）
细胞形态
长梭形或星形，单层贴壁后呈典型成纤维细胞样纺锤状排列
细胞代数
P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时（依赖细胞密度与培养基补充因子）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
· 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1 - 2小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
· 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
· 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项
· 避免频繁观察影响细胞贴壁（建议首日不移动培养器皿）
· 传代后48小时内避免更换培养基以维持细胞分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
· 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证
· 复苏后24小时检测细胞活力（台盼蓝染色存活率≥90%）
· 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应保持基质合成功能）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%（需提供明场显微图像）
4. STR分型与存档数据不符
不予重发情形
1. 未按说明书进行预包被处理导致细胞无法贴壁
2. 使用非推荐生长因子添加剂影响细胞特性
3. 反复离心操作造成机械损伤
4. 未执行标准污染检测流程直接用于共培养实验
