一、细胞基本属性
细胞名称:人腮腺肿瘤细胞(Human Parotid Gland Tumor Cells)
细胞别称:腮腺癌细胞;唾液腺肿瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(性别不限,经病理确诊为腮腺肿瘤)
组织来源:腮腺肿瘤组织(原发灶或转移灶)
生长特性:贴壁生长(部分亚型可呈半悬浮状态)
细胞形态:异型性明显,核质比增大,可见不规则多角形或梭形
细胞代数:P5 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含肿瘤专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗+表皮生长因子(10 ng/mL)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及肿瘤保护剂),液氮长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(与肿瘤恶性程度相关)
供应限制:仅供肿瘤机制研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,预铺纤维连接蛋白增强贴壁
- 培养瓶:酒精消毒后静置4小时,待细胞伸展后换液
传代标准:融合度达80% - 90%(肿瘤细胞接触抑制减弱,需及时传代)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁辅助脱落
注意事项:
- 避免消化过度(肿瘤细胞间连接松散,易成团)
- 首次传代后48小时内监测细胞迁移能力
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清肿瘤细胞冻存液(含10% DMSO+海藻糖)
细胞密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL(根据肿瘤增殖活性调整)
冻存步骤:
- 离心去除培养基后缓慢滴加冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P3代细胞应保持恶性表型)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰耗尽或运输温度> - 60℃导致细胞死亡(需提供物流凭证)
2. 7天内证实支原体污染(需提供电镜或PCR检测结果)
3. STR分型与数据库不匹配
4. 细胞复苏后贴壁率<70%
不予重发情形:
1. 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
2. 未进行传代前离心去冻存液导致毒性残留
3. 实验操作污染(如共培养体系交叉感染)
4. 未定期进行核型分析导致的遗传漂变问题
注:本产品需遵守《人类遗传资源管理条例》,实验废弃物需经121℃高压灭菌处理