一、细胞基本属性
细胞名称 人肾上腺包膜成纤维细胞(Human Adrenal Capsule Fibroblasts)
细胞别称 HACF;肾上腺成纤维细胞;肾上腺包膜细胞
种属来源 人(Homo sapiens)
年龄性别 健康成人(性别不限,供体筛选无肾上腺疾病史)
组织来源 肾上腺包膜组织
生长特性 贴壁生长(依赖细胞外基质黏附)
细胞形态 典型长梭形或不规则三角形,单层贴壁伸展
细胞代数 P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格 1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基 成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件 气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件 无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间 ~24 - 48小时(依赖培养密度与基质条件)
供应限制 仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀离心后接种
· 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时
传代标准 细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例 1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
· 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
· 避免消化过度(影响细胞外基质分泌能力)
· 传代后12小时补加新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方 无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度 冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
· 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
复苏验证
· 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
· 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应维持基质合成活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供全程温控记录)
2. 5天内证实微生物污染(需提供PCR或培养检测结果)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定与数据库信息不符
不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 使用非指定培养基或血清导致功能异常
3. 未按梯度降温要求进行冻存操作
4. 未进行污染排查直接用于实验