一、细胞基本属性
- 细胞名称：人胰岛细胞（Human Islet Cells）
- 细胞别称：HIslets；胰岛β细胞；胰岛内分泌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无代谢性疾病史）
- 组织来源：胰腺胰岛组织
- 生长特性：贴壁/悬浮混合生长（依赖基质包被条件）
- 细胞形态：圆形或卵圆形团簇状，边界清晰，核质比高
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P2，保留天然分泌功能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/冻存管（含无血清冻存液）或新鲜分离胰岛当量（IEQ）
- 培养基：胰岛专用培养基（含5% FBS + 葡萄糖调节因子 + 生长因子补充剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及功能保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：原代细胞不推荐扩增（维持生理功能优先）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预冷培养基
- 新鲜胰岛：立即转移至培养皿，轻柔洗涤去除运输保护液
- 传代标准：原代细胞不建议传代（特殊需求需定制处理）
- 功能维持：
- 使用低吸附培养皿减少贴壁损伤
- 每48小时更换培养基，维持葡萄糖浓度11 - 20mM
- 消化方法（仅限贴壁亚群）：
- 使用0.25%胰酶 - 胶原酶复合消化液
- 37℃消化5 - 8分钟，轻柔吹打分离细胞团
- 注意事项：
- 避免剧烈震荡（保护细胞间连接与微结构）
- 培养24小时内检测胰岛素基础分泌水平
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 海藻糖复合保护剂）
- 冻存密度：500 - 1000 IEQ/mL或1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测葡萄糖刺激胰岛素分泌（GSIS指数≥2.0）
- 荧光染色评估细胞活性（钙黄绿素/碘化丙啶双标法）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致功能丧失（需提供温度记录数据）
2. 72小时内证实细菌污染（需提供无菌检测报告）
3. 新鲜胰岛活性＜85%（双硫腙染色法）
4. 胰岛素含量＜50μg/IEQ（ELISA检测）
- 不予重发情形：
1. 解冻后未立即使用导致细胞团聚失效
2. 使用非专用培养基影响葡萄糖响应功能
3. 机械分离操作造成细胞结构损伤
4. 未按规范进行功能验证即开展长期培养
注：所有操作需符合《人源性细胞研究伦理规范》，细胞特性可能因供体个体差异存在合理波动。
